BOD測定步驟

        將水樣注滿培養(yǎng)瓶，塞好后應(yīng)不透氣，將瓶置于恒溫條件下培養(yǎng)5天。培養(yǎng)前后分別測定溶解氧濃度，由兩者的差值可算出每升水消耗掉氧的質(zhì)量，即BOD 5 值。由于多數(shù)水樣中含有較多的需氧物質(zhì)，其需氧量往往超過水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培養(yǎng)前需對水樣進行稀釋，使培養(yǎng)后剩余的溶解氧（DO）符合規(guī)定。本實驗采用溶解氧儀測定溶解氧。
　　 一般水質(zhì)檢驗所測BOD 5 只包括含碳物質(zhì)的耗氧量和無機還原性物質(zhì)的耗氧量。有時需要分別測定含碳物質(zhì)耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的區(qū)別含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培養(yǎng)瓶中投加硝化抑制劑，加入適量硝化抑制劑后，所測出的耗氧量即為含碳物質(zhì)的耗氧量。在5天培養(yǎng)時間內(nèi)，硝化作用的耗氧量取決于是否存在足夠數(shù)量的能進行此種氧化作用的微生物，原污水或初級處理的出水中這種微生物的數(shù)量不足，不能氧化顯著量的還原性氮，而許多二級生化處理的出水和受污染較久的水體中，往往含有大量硝化微生物，因此測定這種水樣時應(yīng)抑制其硝化反應(yīng)。
　　 在測定BOD 5 的同時，需用葡萄糖和谷氨酸標準溶液完成驗證試驗。
2、測定儀器
一般實驗室儀器和：
　　 （1）、850A + 臺式溶氧儀（美國ORION公司）。
　　 （2）、TS606/S恒溫培養(yǎng)箱：能控制在(20±1)℃。
　　 （3）、溶解氧瓶：250mL。
　　 （4）、單層玻璃采水器。
　　 （5）、量筒：1000mL。
　　 玻璃器皿要認真清洗，不能吸有毒的或生物可降解的化合物，并防止沾污。
3、測定試劑
     在測定過程中，除特別說明以外，僅使用符合國家標準的分析純試劑和蒸餾水，或具有同等純度的水。水中含銅不得高于0.01mg/L，并不應(yīng)有氯、氯胺、苛性堿、有機物和酸類。
　　 （1）、0.2mol/L氫氧化鈉溶液：將8g氫氧化鈉溶于水，稀釋至1000mL。
　　 （2）、0.2mol/L鹽酸溶液：16.6mL濃鹽酸溶于水，稀釋至1000mL。
　　 （3）、稀釋水：在1只1000mL容量瓶中預(yù)先加入約500mL水，再分別加入氯化鈣溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖溶液各1mL，然后用水稀釋至1000mL，并混合均勻。將此溶液恒溫在20℃左右，然后用小型無油空氣泵進行曝氣，瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布。曝氣時間應(yīng)在2～8 h（也可鼓入適量純氧），使水中的溶解氧接近飽和（不低于8mg/L）。此稀釋水的5日生化需氧量應(yīng)小于0.2mg/L(8h內(nèi)使用)。
4、水樣處理
     （1）、水樣的pH值若超出6.5～7.5范圍時，可用鹽酸或氫氧化鈉稀溶液調(diào)節(jié)至7，但用量不要超過水樣體積的0.5％。
　　 （2）、水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質(zhì)時，可使用經(jīng)訓(xùn)化的微生物接種液的稀釋水進行稀釋，或增大稀釋倍數(shù)，以減少有毒物的濃度。
　　 （3）、含有少量游離氯的水樣，一般放置1～2h游離氯即可消失。對于游離氯在短時間不能消散的水樣，可加入亞硫酸鈉溶液，以除去之。
　　 （4）、從水溫較低的水域中采集的水樣，可遇到含有過飽和溶解氧，此時應(yīng)將水迅速升溫至20℃左右，充分振播，以趕出過飽和的溶解氧。
從水溫較高的水域或污水排放口取得的水樣，則應(yīng)迅速使其冷卻至20℃左右，并充分振搖，使與空氣中氧分壓接近平衡。
　　 （5）、試驗水樣的稀釋
將已知體積水樣置于稀釋容器中，用稀釋水或接種稀釋水稀釋，輕輕地混合，避免夾雜空氣泡。　　　　　　　 

 5、數(shù)據(jù)處理
     按公式計算5日生化需氧量。

6、注意事項
     （1）、每次轉(zhuǎn)移水樣時，要注意一定不能引入氣泡；
　　 （2）、稀釋水應(yīng)臨用現(xiàn)配，并且要保證其中有足夠的溶解氧和適量的無機營養(yǎng)物；
　　 （3）、對于污染嚴重的廢水，應(yīng)參照有關(guān)標準對水樣進行稀釋；
　　 （4）、對于毒性較大，微生物含量較少的廢水，必須對其進行接種培養(yǎng)，具體方法可參見有關(guān)教材。