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熒光檢測(cè)器
[ 2014/3/10 22:02:11 ] [轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明來源:就是要儀器網(wǎng)]

熒光的產(chǎn)生

  從電子躍遷的角度來講,熒光是指某些物質(zhì)吸收了與它本身特征頻率相同的光線以后,原子中的某些電子從基態(tài)中的最低振動(dòng)能級(jí)躍遷到較高的某些振動(dòng)能級(jí)。電子在同類分子或其他分子中撞擊,消耗了相當(dāng)?shù)哪芰?,從而下降到第一電子激發(fā)態(tài)中的最低振動(dòng)能級(jí),能量的這種轉(zhuǎn)移形式稱為無輻射躍遷。由最低振動(dòng)能級(jí)下降到基態(tài)中的某些不同能級(jí),同時(shí)發(fā)出比原來吸收的頻率低、波長(zhǎng)長(zhǎng)的一種光,就是熒光。被化合物吸收的光稱為激發(fā)光,產(chǎn)生的熒光稱為發(fā)射光。熒光的波長(zhǎng)總要長(zhǎng)于分子吸收的紫外光波長(zhǎng),通常在可見光范圍內(nèi)。熒光的性質(zhì)與分子結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系,不同結(jié)構(gòu)的分子被激發(fā)后,并不是都能發(fā)射熒光。

特點(diǎn)

  選擇性高,只對(duì)熒光物質(zhì)有響應(yīng);靈敏度也高,最低檢出限可達(dá)10-12ug/ml,適合于多環(huán)芳烴及各種熒光物質(zhì)的痕量分析。也可用于檢測(cè)不發(fā)熒光但經(jīng)化學(xué)反應(yīng)后可發(fā)熒光的物質(zhì)。如在酚類分析中,多數(shù)酚類不發(fā)熒光,為此先經(jīng)處理使其變?yōu)闊晒馕镔|(zhì),而后進(jìn)行分析。

定量基礎(chǔ)

  在光致發(fā)光中,發(fā)射出的輻射總依賴于所吸收的輻射量。由于一個(gè)受激發(fā)的分子回到基態(tài)時(shí)可能以無輻射躍遷的形式產(chǎn)生能量損失,因而發(fā)射輻射的光子數(shù)通常都少于吸收輻射的光子數(shù),它以量子效率Q來表示。
  在固定的實(shí)驗(yàn)條件下,量子效率是個(gè)常數(shù),通常Q小于1。對(duì)可用熒光檢測(cè)的物質(zhì)來說,Q值一般在0.1~0.9之間。熒光強(qiáng)度F與吸收光強(qiáng)度成正比。對(duì)于稀溶液,熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)溶液濃度、摩爾吸光系數(shù)、吸收池厚度、入射光強(qiáng)度、熒光的量子效率及熒光的收集效率等成正相關(guān)。在其他因素保持不變的條件下,物質(zhì)的熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)溶液濃度成正比,這是熒光檢測(cè)器的定量基礎(chǔ)。熒光檢測(cè)器屬于溶質(zhì)型檢測(cè)器,可直接用于定量分析。


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